• <dl id="mhdre"></dl><li id="mhdre"></li>
    <progress id="mhdre"><tr id="mhdre"></tr></progress>
    <dl id="mhdre"><ins id="mhdre"></ins></dl>
    <div id="mhdre"><s id="mhdre"></s></div> <div id="mhdre"><s id="mhdre"></s></div><div id="mhdre"><tr id="mhdre"></tr></div>

    欢迎来到 阿仪网

    免费注册

    首页 | 产品 | 求购 | 资讯 | 专题 | ?#39029;?#21830; | 打听 | 人才 | 品牌 | 资料 | 技术文献 | 展会 | 耗材 | 配件 | 新品 | 促销 | 书籍 | 招标 | 优质仪器

    您的位置: 首页 >技术文献 >产品说明 >小鼠抵抗素(resistin)ELISA试剂盒操作步骤

    小鼠抵抗素(resistin)ELISA试剂盒操作步骤

    提供者?#32791;?#20140;森?#20419;?#29983;物科技有限公司   发布时间:2019/4/23  阅读次数:75次   进入该公司展台

    小鼠抵抗素(resistin)ELISA试剂盒使用说明书

    本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清,血浆及相关液体样本中小鼠抵抗素(resistin)的含量。

    实验原理:

    本试剂盒应用双抗体?#34892;?#27861;测定标本中小鼠抵抗素(resistin)水平。用纯化的小鼠抵抗素(resistin)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中?#26469;?#21152;入抵抗素(resistin),再与HRP标记的抵抗素(resistin)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的抵抗素(resistin)?#25910;?#30456;关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠抵抗素(resistin)浓度。

    试剂盒组成:

    试剂盒组成

    48孔配置

    96孔配置

    保存

    说明书

    1份

    1份

     

    封板膜

    2片(48)

    2片(96)

     

    密封袋

    1个

    1个

     

    酶标包被板

    1×48

    1×96

    2-8℃保存

    标准品:27μg/L

    0.5ml×1瓶

    0.5ml×1瓶

    2-8℃保存

    标准品稀释液

    1.5ml×1瓶

    1.5ml×1瓶

    2-8℃保存

    酶标试剂

    3ml×1瓶

    6ml×1瓶

    2-8℃保存

    样品稀释液

    3ml×1瓶

    6ml×1瓶

    2-8℃保存

    显色剂A液

    3ml×1瓶

    6ml×1瓶

    2-8℃保存

    显色剂B液

    3ml×1瓶

    6ml×1瓶

    2-8℃保存

    终止液

    3ml×1瓶

    6ml×1瓶

    2-8℃保存

    浓缩洗涤液

    (20ml×20倍)×1瓶

    (20ml×30倍)×1瓶

    2-8℃保存

    样本处理及要求:

    1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。

    2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。

    3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参?#24080;敵小?/span>

    4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

    5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入?#27426;?#37327;的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入?#27426;?#37327;的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。

    6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.

    7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

    操作步骤:

    1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第?#30446;祝?#20877;在第三、第?#30446;?#20998;别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第?#30446;?#20013;先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为18μg/L,12μg/L,6μg/L,3μg/L,1.5μg/L)。

    2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板?#27927;?#27979;样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混?#21462;?/span>

    3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

    4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。

    5. 洗涤:小心?#19994;?#23553;板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

    6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

    7. 温育:操作同3。

    8. 洗涤:操作同5。

    9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.

    10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

    11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进?#23567;?/span>

    注意事项:

    1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

    2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

    3. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,?#21592;?#20813;试验误差。一次加样时间最?#27599;?#21046;在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

    4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做?#32431;住?#22914;标本?#20889;?#27979;物质含?#25239;?#39640;(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释?#27426;?#20493;数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。

    5. 封板膜只限一次性使用,?#21592;?#20813;交叉污?#23613;?/span>

    6. 底物请避光保存。

    7. ?#32454;?#25353;照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

    8. 所有样品,洗涤液和各种废弃物?#21152;Π创?#26579;物处理。

    9. 本试剂不同批号组分?#22351;?#28151;用。

    10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。

    计算:

    ?#21592;?#20934;物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD?#28068;?#26631;准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。

    标准曲线图 

    (此图仅供参考)

    试剂盒?#38405;埽?/span>

    1. 样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以?#31232;?/span>

    2. 批内与批应分别小于9%和11%

    检测范围:

    1μg/L-20μg/L

    保存条件及?#34892;?#26399;:

    1. 试剂盒保存:2-8℃。

    2. ?#34892;?#26399;:6个月

    优质商品

    X射线荧光光谱仪
    X射线荧光光谱仪

    旗下频道

    色谱仪 光谱仪 反应釜 试验箱 试验机 搅拌器 培养箱 离心机 水分测定 气体检测 量热仪 石油仪器 纯水器 比表面仪 温度记录 流量计 万用表 显微镜 粒度仪 测厚仪 硬度计 酸度计 元素分析 生物试剂 电线电缆 天平衡器 传感器 食品检测 压力仪表 电化学 测厚仪 阀门仪表 电力仪表 干燥设备 药物检测
    重庆时时彩龙虎近100期
  • <dl id="mhdre"></dl><li id="mhdre"></li>
    <progress id="mhdre"><tr id="mhdre"></tr></progress>
    <dl id="mhdre"><ins id="mhdre"></ins></dl>
    <div id="mhdre"><s id="mhdre"></s></div> <div id="mhdre"><s id="mhdre"></s></div><div id="mhdre"><tr id="mhdre"></tr></div>
  • <dl id="mhdre"></dl><li id="mhdre"></li>
    <progress id="mhdre"><tr id="mhdre"></tr></progress>
    <dl id="mhdre"><ins id="mhdre"></ins></dl>
    <div id="mhdre"><s id="mhdre"></s></div> <div id="mhdre"><s id="mhdre"></s></div><div id="mhdre"><tr id="mhdre"></tr></div>