• <dl id="mhdre"></dl><li id="mhdre"></li>
    <progress id="mhdre"><tr id="mhdre"></tr></progress>
    <dl id="mhdre"><ins id="mhdre"></ins></dl>
    <div id="mhdre"><s id="mhdre"></s></div> <div id="mhdre"><s id="mhdre"></s></div><div id="mhdre"><tr id="mhdre"></tr></div>

    歡迎來到 阿儀網

    免費注冊

    首頁 | 產品 | 求購 | 資訊 | 專題 | 找廠商 | 打聽 | 人才 | 品牌 | 資料 | 技術文獻 | 展會 | 耗材 | 配件 | 新品 | 促銷 | 書籍 | 招標 | 優質儀器

    您的位置: 首頁 >技術文獻 >分析方法 >解決這幾點,elisa實驗不成功都難

    解決這幾點,elisa實驗不成功都難

    提供者:上海勁馬實驗設備有限公司   發布時間:2018/10/9  閱讀次數:94次   進入該公司展臺

        ELISA實驗因靈敏度高,特異性強在生物科研上得到了廣泛的認可,但對初學者而言,如不注意實驗操作過程中的各個環節,可能會對zui終的實驗結果產生比較大的影響,比如實驗出現白板,顯色弱靈敏度低,花板無梯度背景高等現象。下面對以上實驗現象進行一一解析。
          

    一、白板現象
        在完成所有實驗步驟進行底物TMB溶液顯色后,酶標板中所有孔的顏色均為無色,即無信號呈現。

    出現該現象的可能原因:
    1.試劑已過保質期,不同批次稀釋液交叉使用。
    2.錯加漏加檢測A,檢測B或者底物溶液TMB。
    3.洗板或者加樣過程中,酶標記物被污染失活,稀釋液中含有酶抑制劑如疊氮吶等。
    4.配置稀釋液的蒸餾水可能被污染。
    5.洗滌液是濃縮型的,沒有按比例進行稀釋。
    6.酶標記物的活性和效價比較低。
    7.溶液的PH值不正確,一般稀釋液的PH值應保持在7.2-7.4。

    二、顯色弱靈敏度低
        在完成所有實驗步驟進行底物TMB溶液顯色后,酶標板中孔的顯色比較淺,即只有微弱的信號呈現。

    出現該現象的可能原因:
    1.產品過有效期,試劑沒有按規定進行適當的保存。
    2.試劑,標準品或者樣品在使用前沒有平衡到室溫。
    3.少加了試劑的量或者加入試劑的稀釋比例不當。
    4.洗板或者加樣過程中,酶標物受污染失活。
    5.孵育時間和孵育溫度未達到實驗要求。
    6.洗滌液稀釋倍數不符合要求,洗板次數過多,洗板沖擊力過大,洗板浸泡時間過長。
    7.底物溶液TMB顯色時間太短。

    三、花板無梯度背景高
        在完成所有實驗步驟進行底物TMB溶液顯色后,酶標板中的孔有顏色但沒有梯度,背景也可能較高。

    出現該現象的可能原因:
    1.底物溶液TMB未置于陰涼避光處保存,實驗前溶液已經變藍。
    2.孵育溫度過高或者孵育時間過長,發生了較強的非特異性吸附。
    3.沒有按說明書要求洗板,特別是洗板時洗滌液的量少加了。
    4.加樣時沒有換槍頭造成交叉污染。
    5.花板現象:低濃度或者低活性的包被抗體或者檢測抗體,封閉不足導致的本底不穩定,洗板不充分,包被板子的問題。

    綜上所述:在ELISA實驗中應注意以下問題:
    1.在實驗前應該按相關要求將實驗試劑平衡至室溫。
    2.包被抗體和檢測抗體應該是有高活性的且都針對同一抗原。
    3.試劑保存:蛋白抗體類試劑保存于-20攝氏度,顯色液洗滌液保存于2-8攝氏度。
    4.各試劑在使用前應充分混勻,以保證試劑的均一性和準確性。
    5.嚴格控制反應溫度和反應試劑。
    6.洗板次數,洗板液的量,洗板液浸泡時間的長短,洗板的力度都是應該注意的問題。
    7.相關濃縮液應按要求稀釋到相應比例方可使用,PH值要保持在7.2-7.4之間。
    8.在終止反應時盡量避免微孔中存有氣泡。
    9.終止反應完成后應該在2min內完成酶標儀讀數。

        好了,以上就是勁馬為您帶來的一些實驗小技巧,如果您正確的掌握了這些,那您的實驗不成功也是難事。勁馬以誠信為本,努力打造優質的品牌,為您提供全方位的售中、售前、售后服務,具有優質的技術團隊,把國際上優質的產品引入國內市場,滿足國內廣大客戶的需求,在二十一世紀生命科學蓬勃發展的時代,將緊跟生命科學的發展動態,為廣大科研學者探索生命的奧秘而奉獻綿薄之力!
                
     

    優質商品

    X射線熒光光譜儀
    X射線熒光光譜儀

    旗下頻道

    色譜儀 光譜儀 反應釜 試驗箱 試驗機 攪拌器 培養箱 離心機 水分測定 氣體檢測 量熱儀 石油儀器 純水器 比表面儀 溫度記錄 流量計 萬用表 顯微鏡 粒度儀 測厚儀 硬度計 酸度計 元素分析 生物試劑 電線電纜 天平衡器 傳感器 食品檢測 壓力儀表 電化學 測厚儀 閥門儀表 電力儀表 干燥設備 藥物檢測
    重庆时时彩龙虎近100期
  • <dl id="mhdre"></dl><li id="mhdre"></li>
    <progress id="mhdre"><tr id="mhdre"></tr></progress>
    <dl id="mhdre"><ins id="mhdre"></ins></dl>
    <div id="mhdre"><s id="mhdre"></s></div> <div id="mhdre"><s id="mhdre"></s></div><div id="mhdre"><tr id="mhdre"></tr></div>
  • <dl id="mhdre"></dl><li id="mhdre"></li>
    <progress id="mhdre"><tr id="mhdre"></tr></progress>
    <dl id="mhdre"><ins id="mhdre"></ins></dl>
    <div id="mhdre"><s id="mhdre"></s></div> <div id="mhdre"><s id="mhdre"></s></div><div id="mhdre"><tr id="mhdre"></tr></div>